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>>Bilirubine totale et conjugée : dosage

5 novembre 2009
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Niveau de mise à jour : 4

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NB 1 : les données qui manquent dans ce texte figurent sur la notice fournie par le fabricant.
NB 2 : la fiche est écrite en prenant pour exemple les réactifs Biolabo. [1].
Désignation du coffret : Bilirubine totale et directe Réf. Biolabo 80403

1. Le coffret : données techniques

Composition :
- 1 flacon de 200 ml de réactif R1 (bilirubine totale),
- 1 flacon de 200 ml de réactif R2 (bilirubine directe),
- 1 flacon de 40 ml de réactif R3 (nitrite de Na).

Conservation :
- température ambiante durant le transport,
- entre + 2° et + 8°C au laboratoire.

2. Matériel nécessaire :

- spectrophotomètre (λ 550 nm),
- bain-marie 37°C (ou bloc du spectrophotomètre thermostaté à 37°C),
- pipettes : 1 ml, 50 µl et 100 µl,
- éventuellement tubes à hémolyse (5 ml ou 3 ml) avec bouchon,
- compte-temps.

3. Prélèvement de sang

- Patient à jeun depuis au moins 3 heures.
- Prélever sur héparine (tube vert) ou sans anticoagulant (tube rouge).
- Centrifuger dès que possible et conserver le sérum à l’obscurité (ou pénombre).
- Analyser dans un délai < 4 heures ; si impossible conserver le sérum dans le réfrigérateur (3 à 5 jours maximum).

4. Mode opératoire

Sortir les réactifs du réfrigérateur et laisser à températ. ambiante pendant environ 15 min.

Régler le spectrophotomètre

- λ 550 nm (ou entre 540 et 560),
- thermostat 37°C,
- à défaut de spectrophotomètre thermostaté régler un bain-marie à 37°C,
- la réaction peut aussi se faire à température ambiante (cf. infra).

4.1. Dosage de la bilirubine totale

Dans 2 cuves de lecture (ou 2 tubes à hémolyse) placées à 37°C (ou à température ambiante) introduire successivement :

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B. Totale.

Remarque :
- si concentration >200 mg/l (ou 340 µMoles/l) il faut refaire le dosage en utilisant une
dilution du sérum dans une solution de ClNa à 9 g/l (sérum physiologique),
- ne pas oublier de multiplier la concentration par le facteur de dilution.
Exemple : .dilution du sérum au 1/2.

  • concentration de bilirubine dans la dilution : 120 mg/l,
  • résultat : 120 x 2 = 240 mg/l.

4.2. Dosage de la bilirubine conjuguée (ou directe)

- Le dosage de la bilirubine directe et de la bilirubine totale se fait sur le même prélèvement.
- Il est inutile de doser la bilirubine directe si la bilirubine totale est < 15 mg/l (26 µMoles/l).

Dans 2 cuves de lecture (ou 2 tubes à hémolyse) placées à 37°C (ou à température ambiante) introduire successivement :

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B. Conjuguée.

5. Calcul de la concentration en bilirubine

Suivre le chemin tracé dans les tableaux situés tout en bas de l’article.

6. Valeurs habituelles de la bilirubine chez l’adulte et l’enfant âgé de plus d’une semaine

- Bilirubine totale : inférieur à 12 mg/l ou à 20 µMoles/litre.
- Bilirubine conjuguée (directe) : inférieur à 2 mg/litre ou à 3 à 4 µMoles/litre

7. Définitions :
- 7.1. La bilirubine totale est constituée de 2 fractions : indirecte et directe.
En d’autres termes : bilirubine totale = bilirubine indirecte + bilirubine directe.
- 7.2. Bilirubine conjuguée et bilirubine directe sont des termes synonymes.
C’est la fraction qui augmente dans les situations d’obstacle à l’écoulement de la
bile dans les voies biliaires
(cholestase).
- 7.3. Bilirubine libre et bilirubine indirecte sont des termes synonymes.
C’est la fraction qui augmente dans les situations d’hémolyse excessive (par exemple dans la drépanocytose homozygote, les incompatibilités foeto-maternelles, les hémolyses toxiques, les hémolyses auto-immunes).

8. Tableaux des calcul de concentrations (Cliquer pour agrandir).

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B. Totale.
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B. Conjuguée.

notes

[1Biolabo : 02160 Maizy France. Tél. (00.33) 3.23.25.15.50. Mail : info-Vent@biolabo.fr. Site : www.biolabo.fr

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