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>>Mesure de l’hématocrite (et de l’hémoglobine).

5 novembre 2009
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Niveau de mise à jour : 4

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- MACRO - MÉTHODE

Principe :

Mesure du volume totale de globules rouges du sang total.

Du sang prélevé sur un anticoagulant (EDTA) est placé dans un tube et centrifugé pour rassembler tous les globules rouges (GR) au fond du tube.
On lit directement la hauteur du volume occupé par les GR dans le tube que l’on rapporte, en pourcentage, à la hauteur totale de sang.
Un tube gradué facilite la lecture.

Matériel

- Tube (de préférence gradué) à hématocrite : diamètre = 0,6 cm, longueur = 9,5 cm, graduation : 0 à 100.
- Pipette Pasteur + poire.
- Centrifugeuse électrique ou à main.

Mode opératoire

- A l’aide de la pipette pasteur, remplir le tube de sang jusqu’à la graduation 100.
- Centrifuger 10 minutes à environ 3000 t / mn.
- Lire le résultat à la hauteur de la ligne de démarcation entre les globules rouges et la couche de leucocytes. S’assurer que l’on utilise la bonne série de graduations, vers le haut en direction du 100.
- Calcul : hauteur des GR / hauteur totale du sang x 100 = hématocrite en %.

- MICRO - METHODE

Principe

Le sang est placé dans un tube capillaire et centrifugé pour rassembler tous les GR au fond.

Matériel

- Tube capillaire : diamètre = 1,5 mm, longueur = 75 mm.
- Cire molle ou pâte à modeler ou savon un peu pâteux.
- Centrifugeuse à micro-hématocrite (ou ordinaire, à main ou électrique, si défaut).
- Réglette spéciale hématocrite pour la lecture ou simple règle graduée.

Mode opératoire

- Placer l’extrémité du tube capillaire cerclée de rouge dans le tube du prélèvement sanguin ou dans une goutte de sang si prélèvement capillaire.
- Le sang pénètre dans le tube par capillarité. Incliner si besoin le tube pour faciliter son remplissage. Le laisser se remplir environ aux ¾.
- Boucher, avec la cire molle, l’extrémité du tube capillaire, sur environ 2 mm de longueur.
- Identifier les prélèvements sur chaque tube capillaire.
- Déposer les différents tubes capillaires dans les rainures du plateau de la centrifugeuse à micro-hématocrite. L’extrémité bouchée doit être posée à la périphérie du plateau.
- Centrifuger à grande vitesse 10 mn.

Lorsque l’on a pas de centrifugeuse à micro-hématocrite, on place les tubes à hématocrite numérotés dans un tube de grand diamètre au fond duquel on a mis un peu de coton (pour que les micro-tubes ne se brisent pas). Le coté pâte à modeler du capillaire est au fond du tube. On place ce tube dans la centrifugeuse à main ou électrique et on centrifuge à environ 3 000 tours (vitesse maximale pour une centrifugeuse à main) pendant environ 10 minutes.

En l’absence de tubes capillaires ou à micro-hématocrites on peut pratiquer avec le sans recueilli dans un simple tube à hémolyse mais :
- ceci nécessite plus de sang,
- le tube étant nettement plus court, la mesure est moins précise.

Lecture

- Mesurer la hauteur totale de sang : T
- Mesurer la hauteur des globules : G
- Calcul : hauteur des GR / hauteur totale du sang x 100 = hématocrite en %.

- VALEURS NORMALES

Hommes 40 à 50 %
Femmes 37 à 43 %
Enfants (5 ans) 38 à 44 %
Nourrissons (3 mois) 35 à 40 %
Nouveaux nés 50 à 58 %

- MESURE DE L’HEMOGLOBINE

La concentration d’hémoglobine en g/l est égale à l’hématocrite divisé par 3.
Exemple : 42% / 3 = 14 g/l d’hémoglobine.


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