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>>Urines avec dénombrement bactérien

4 août 2014
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La mise en culture n’est pas systématique, elle ne se pratique que sur des urines :
- présentant des signes d’infection : leucocytes > à 10/mm3 (ou, examinées entre lame et lamelle, plus de 1 leucocyte / 10 à 20 champs d’urines non centrifugées, objectif X 40),
- non contaminées : pas plus de deux germes différents au Gram.

Ensemencement de la boite pour culture avec dénombrement d’unités formant colonies (UFC).
Les images ci-dessous sont reproduites avec l’aimable autorisation de bioMérieux®.

La culture est réalisée immédiatement après le prélèvement si non l’urine peut être conservée au réfrigérateur moins de 12 h.

Homogénéiser le prélèvement en agitant le flacon de prélèvement.
Ensemencer une gélose BCP [1] avec une oese calibrée de 10 microlitres ou, à défaut, en déposant une très petite goutte et en l’isolant avec une pipette ou une oese non calibrée selon la technique suivante :
- tremper l’oese calibrée verticalement dans l’urine homogénéisée,
- faire un dépot sur un rayon de la boîte pour décharger l’oese puis, sans la recharger, faire des stries perpendiculaires serrées sur toute la surface de la boîte,

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Encemencement pour dénombrement

- incuber 24 h à l’étuve à 37 °C.

Après incubation on obtient une culture qu’on comparera aux images ci-dessous pour trouver le dénombrement

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Densité de culture pour 1 000 à 1 000 000 UFC/ml

Exprimer ce dénombrement en nombre de bactéries ou d’UFC par ml d’urine.

- Attention à ne pas sous-estimer le nombre des petites colonies qui ont toujours tendance à faire minorer l’évaluation du nombre des bactéries.
- Rappel : l’observation d’environ 1 bactérie par champ microscopique (objectif x 40, urine non centrifugée,) correspond approximativement à 10 000 UFC/ml.

Interprétation des résultats

L’interprétation du dénombrement des germes urinaires DOIT se réalise en corrélation avec le taux de leucocytes.

Le dénombrement bactérien est UN DES ÉLÉMENTS qui permet de faire la distinction entre souillure et infection vraie.
- 0 à 1000 UFC / ml et taux de GB inférieur à 1 000 / ml : infection est très peu probable.
- 0 à 1000 UFC /ml et taux de GB supérieur à 1 000 / ml :

  • patient sous antibiotique ou antiseptique,
  • tuberculose urinaire,
  • rarement infection à Ureaplasma urealiticum, lithiase rénale, prostatite à Chlamydia...

- 10 000 UFC/ml (valeur limite) ET taux de GB inférieur à 1 000 / ml : infection est très peu probable.
- 10 000 UFC/ml (valeur limite), ET si la culture est mono microbienne ET taux de GB supérieur à 1 000 / ml : infection probable.
- 100 000 UFC/ml ou plus, observer le nombre de type de colonies :

  • un seul type de colonie : poursuivre l’analyse,
  • 2 types de colonies : poursuivre l’analyse, faire une identification de l’espèce majoritaire ou des deux espèces si elles sont en quantité équivalente,
  • 3 ou + : rendre « Urines contaminées. Ininterprétable. Renouveler le prélèvement ».

Ultérieurement

Les procédés d’identification et d’antibiogramme à appliquer aux colonies isolées sortent du cadre de ce site Bioltrop.
Vous pourrez cependant trouver d’importantes informations concernant l’identification dans le fichier Word lié à URINES V8_Terry_Gille.


notes

[1Les géloses chromogènes (comme celle présentée ci-dessous sur l’image de bioMérieux) sont très pratiques mais elles sont chères et ne peuvent être préparées au laboratoire d’analyse.

info portfolio

Densité de culture pour 1 000 à 1 000 000 UFC/ml

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